1.Anspach,F.,Curbelo,D.,Hatrmann,R.,Garke,G.,andDecwer,W.Expanded-bedchromatographyinprimaryproteinpurification.J.Chromatogr.A1999;865:129-144.2.Richardson,J.F.andZaki,W.N.Sedimentationandfluidization:PartI.Trans.Inst.Chem.Eng.1954;32:35-52.3.Thommes,J.Fl...[繼續(xù)閱讀]

    對于少量樣品(如約100mL),首先用結(jié)合緩沖液(pH值和離子強(qiáng)度參照吸附劑的適合條件)平衡吸附劑,然后將吸附劑與原材料在試管或燒瓶中混合。如果吸附劑粒徑小且載體無孔的話,那么只需幾分鐘(通常5min即足夠)即可達(dá)到吸附平衡狀態(tài)...[繼續(xù)閱讀]

    下面通過實(shí)驗(yàn)解釋如何評估磁力吸附劑對目標(biāo)蛋白的回收效能。實(shí)驗(yàn)選用的原材料為添加有胰蛋白酶的干酪乳清;磁力載體經(jīng)苯甲脒(一種絲氨酸蛋白酶抑制劑)衍生化[14],得到含有苯甲脒基團(tuán)的磁力吸附劑。本例中,我們希望展示能解...[繼續(xù)閱讀]

    高梯度磁力分離(high-gradientmagneticseparation,HGMS)的基本原理很簡單,類似于深層過濾[16-21]。事實(shí)上,HGMS可以被認(rèn)為是一種深層過濾系統(tǒng),不同的是它在傳統(tǒng)的深層過濾系統(tǒng)的運(yùn)送機(jī)制中添加了磁引力。它的罐體中填充著可磁化的分離基質(zhì)...[繼續(xù)閱讀]

    從分批結(jié)合步驟到利用高效磁力過濾器處理吸附劑(即吸附劑的捕獲、清洗和洗脫)的整體過程,我們稱之為HGMF[1]。該技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于從不同原材料中捕獲蛋白質(zhì)[1-14]。圖3.2和圖3.3分別呈現(xiàn)了典型的HGMF過程簡圖和半工業(yè)化的HG...[繼續(xù)閱讀]

    如圖3.6所示,對于基本HGMF過程的設(shè)計,將整個開發(fā)分為多個階段是非常方便的,這在參考文獻(xiàn)11中也有報道。過程設(shè)計首先應(yīng)確定最合適的配體類型和磁力吸附劑,然后優(yōu)化結(jié)合、清洗和洗脫條件。接下來是磁力過濾器捕獲階段,還應(yīng)包括...[繼續(xù)閱讀]

    目前,多種不同設(shè)計的磁力載體材料已商品化,并且已應(yīng)用于一些小規(guī)模的生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中(如質(zhì)粒分離、細(xì)胞分選、常規(guī)診斷等)。如表3.1所示,作為一種磁力敏感型吸附劑,它的很多特性都與傳統(tǒng)色譜介質(zhì)的特性相似,但也具備一些特殊...[繼續(xù)閱讀]

    一旦確定合適的超順磁載體,那么接下來對配體的選擇也將是至關(guān)重要的。通過對目標(biāo)蛋白、原材料和現(xiàn)有文獻(xiàn)的了解,我們有可能得出高效配體的特點(diǎn)。但是,對于一個新蛋白質(zhì)而言,我們必須通過篩選吸附劑的方法來確定合適的配體...[繼續(xù)閱讀]

    最近,Meyer及其同事[11]以從天然干酪乳清中回收超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)為例,提出了HGMF過程開發(fā)的一般策略(圖3.6)。他們指出,HGMF吸附劑在各個階段的最適使用條件可以通過小規(guī)模(1～5mL)分批實(shí)驗(yàn)迅速確定,直接傳遞入HGMF過...[繼續(xù)閱讀]

    目前,由于缺少市場,還沒有適合于工業(yè)化下游工程的商品化磁力分離系統(tǒng)。盡管如此,磁力分離的物理原理、由平行的大規(guī)模生產(chǎn)獲得的多樣化設(shè)計及其固有優(yōu)勢,為其在即將到來的工業(yè)化下游工程中的應(yīng)用進(jìn)展提供了堅實(shí)的基礎(chǔ)。磁...[繼續(xù)閱讀]