miRNA加工途徑的功能性鑒定方法

摘要： 目的 構(gòu)建新型慢病毒載體，以尋求最佳的miRNA加工途徑功能性鑒定方法。方法 通過一種雙功能慢病毒載體同時表達報告分子綠色熒光蛋白(GFP)以及GFP特異性miRNA初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(pri-miRNA);后者利用內(nèi)源性miRNA加工途徑形成GFP特異性成熟miRNA,進而干擾報告分子GFP的表達，通過GFP的表達水平監(jiān)控miRNA加工途徑。結(jié)果 在腫瘤細胞系和皮膚原代細胞中驗證了...