表達(dá)翻轉(zhuǎn)重組酶的真核載體的構(gòu)建
徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)
頁數(shù): 3 2012-07-25
摘要: 目的 構(gòu)建表達(dá)翻轉(zhuǎn)重組酶(FLP)重組表達(dá)的真核載體。方法 以質(zhì)粒pFRT為模板,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增出兩端包含了XbaⅠ和BamHⅠ內(nèi)切酶識別位點(diǎn)的全長FLP基因片段,將該片段插入用NheⅠ和BamHⅠ雙酶切后的載體質(zhì)粒pBK-CMV上,構(gòu)建出重組質(zhì)粒pBK-CMV-FLP。經(jīng)過轉(zhuǎn)化、挑選菌落,PCR鑒定且測序均正確。結(jié)果 成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pBK-CMV-FLP。結(jié)論...