利用無縫克隆方法構(gòu)建埃及伊蚊表皮蛋白基因AaCPR100A雙向啟動子蘇云金芽孢桿菌穿梭載體

摘要： 目的 構(gòu)建表達(dá)dsRNA的雙向啟動子以及靶基因AaCPR100A的大腸桿菌-蘇云金芽孢桿菌穿梭載體pHT315-AaCPR100A。方法 以蘇云金芽孢桿菌pSVP27A質(zhì)粒為模板通過PCR擴(kuò)增蘇云金芽孢桿菌Cry3A正向啟動子Pro-1（+）；以埃及伊蚊RNA反轉(zhuǎn)為cDNA為模板，擴(kuò)增靶基因AaCPR100A；將大腸-蘇云金穿梭載體pHT315質(zhì)粒經(jīng)HindⅢ和SalⅠ雙酶切線...