抗periostin人源化單克隆抗體的制備及鑒定

摘要： 目的：制備抗periostin人源化單克隆抗體，建立穩(wěn)定的細(xì)胞株。方法：以本實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā)的抗periostin鼠單抗為基礎(chǔ)，提取細(xì)胞總RNA，經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增V_H和V_L基因測(cè)序獲得可變區(qū)序列，將小鼠抗體CDR區(qū)域移植到人源抗體框架受體區(qū)域，基因合成后亞克隆到表達(dá)載體PATX-GS2，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞，經(jīng)MSX加壓篩選、有限稀釋獲得單克隆細(xì)胞株。結(jié)果：經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增... （共6頁(yè)）