黃芩苷和沉默基因acrA、marA和acrD對耐藥大腸埃希菌環(huán)丙沙星敏感性的影響

摘要： 為探討反義寡核苷酸(ASODN)沉默acrA、marA和acrD基因前后,黃芩苷對臨床耐藥大腸埃希菌(E.coli)環(huán)丙沙星敏感性的影響,設(shè)計并合成3個基因的ASODN引物,設(shè)置空白對照組、黃芩苷組、ASODN沉默組、ASODN沉默+黃芩苷組,分別轉(zhuǎn)染到臨床耐藥菌感受態(tài)細胞中,涂布于一定濃度環(huán)丙沙星平板上,培養(yǎng)觀察菌落生長情況并計數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),相對于空白對照組,黃芩苷組菌落數(shù)顯著降低;acrA、acrD和marA基因沉默組與空白對照組相比,除了acrD基因沉默1號菌株和marA基因沉默的Y17菌株外,其余菌株在環(huán)丙沙星平板上的菌落數(shù)也出現(xiàn)不同程度地下降,具有顯著性差異;acrA、acrD和marA基因沉默+黃芩苷組與黃芩苷組相比,多數(shù)菌株在環(huán)丙沙星平板上的菌落數(shù)均出現(xiàn)不同程度地下降;acrA基因沉默+黃芩苷組與acrA基因沉默組相比,4株菌株變化差異不顯著,Y17號菌株菌落數(shù)有所上升,J45號菌株在該基因沉默后,環(huán)丙沙星平板上的菌落數(shù)出現(xiàn)下降的趨勢,差異顯著;acrD基因沉默+黃芩苷組與acrD基因沉默組相比,除了1號菌株變化差異不顯著外,其余5株菌株變化差異顯著,但Y17號菌株菌落數(shù)上升;marA基因沉默+黃芩苷組與marA基因沉默組相比,除了Y17、Y35這2株菌株變化差異顯著外,其余4株菌株變化差異不顯著。以上結(jié)果表明,黃芩苷主要通過抑制acrA和marA發(fā)揮外排抑制作用,acrD不是其增強環(huán)丙沙星敏感性的主要靶點。 （共5頁）