菝葜RAPD擴(kuò)增條件優(yōu)化

摘要： 目的研究菝葜的RAPD-PCR擴(kuò)增體系最適宜的條件。方法采用CTAB提取方法,從菝葜的嫩葉中提取總基因組DNA,以此為模板,優(yōu)化菝葜RAPD-PCR的反應(yīng)條件。結(jié)果 最適宜的PCR擴(kuò)增體系為:反應(yīng)體積30μL,內(nèi)含0.20μmol/L引物、200μmol/L dNTP4、0 ng模板DNA、2 UTaqDNA聚合酶、2μmol/L Mg2+。結(jié)論通過(guò)擴(kuò)增條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn),建立了重復(fù)性好、穩(wěn)定性高的藥用植物菝葜RAPD-PCR擴(kuò)增體系最適宜的條件,篩選出條帶清晰多態(tài)性好的14條隨機(jī)引物,共擴(kuò)增得到144條電泳帶,其中有多態(tài)性帶62條,檢測(cè)到了62個(gè)多態(tài)性位點(diǎn),多態(tài)率為43%。 （共4頁(yè)）