APP 脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是由許多脫氧核苷酸以3,5-磷酸二酯鍵連接成線性多聚核苷酸的生物大分子化合物,分子質(zhì)量至少在幾千道爾頓。DNA是生命的最基本物質(zhì)之一,廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物體內(nèi)。DNA分子的功能是...[繼續(xù)閱讀]
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脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是由許多脫氧核苷酸以3,5-磷酸二酯鍵連接成線性多聚核苷酸的生物大分子化合物,分子質(zhì)量至少在幾千道爾頓。DNA是生命的最基本物質(zhì)之一,廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物體內(nèi)。DNA分子的功能是...[繼續(xù)閱讀]
2.1.2.1STR遺傳標(biāo)記序列1981年,Miesfeld等在人δ和β珠蛋白基因之間發(fā)現(xiàn)一類[TG]n組成的雙核苷酸重復(fù)序列。1989年,Litt和Weber等在研究心肌肌動(dòng)蛋白基因時(shí),也發(fā)現(xiàn)[CA]n二堿基為核心序列的串聯(lián)重復(fù)。同年,Edwards等應(yīng)用測(cè)序方法分析“自毀容...[繼續(xù)閱讀]
STR自動(dòng)分型技術(shù)廣泛應(yīng)用于法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室,具有自動(dòng)化程度高、快速、靈敏、準(zhǔn)確、穩(wěn)定、重復(fù)性好等特點(diǎn)。聯(lián)合采用多重復(fù)合擴(kuò)增反應(yīng)、毛細(xì)管電泳和熒光檢測(cè),可以得到十幾個(gè)到幾十個(gè)STR基因座的分型信息。STR自動(dòng)分型技術(shù)的核心...[繼續(xù)閱讀]
2.2.1.1DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)1957年,ArthurKornberg等從大腸桿菌中分離出了一種以DNA為模板催化單核苷酸聚合的酶,稱之為Kornberg酶。它是由單一多肽組成的球蛋白,相對(duì)分子量為103kD。Kornberg酶后被證實(shí)為DNA聚合酶Ⅰ。DNA聚合酶Ⅰ可被枯草桿菌蛋...[繼續(xù)閱讀]
隨著PCR技術(shù)的發(fā)展,先后出現(xiàn)了一些問題,如非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn),引物二聚體的形成,甚至凝膠電泳上無(wú)擴(kuò)增帶。這些問題的產(chǎn)生限制了PCR技術(shù)的應(yīng)用。熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的問世解決了這些問題,使PCR技術(shù)更加完美。2.2.2.1熱啟動(dòng)PCR的產(chǎn)...[繼續(xù)閱讀]
2.2.3.1所需化學(xué)試劑及配制熱啟動(dòng)耐高溫DNA聚合酶制備時(shí)所需的化學(xué)試劑及其配制方法如表2-2。表2-2熱啟動(dòng)耐高溫DNA聚合酶制備所需化學(xué)試劑及配制方法續(xù)表2-22.2.3.2耐高溫TaqDNA聚合酶的制備1.酶蛋白表達(dá)(1)取出菌種,將少許的冰凍菌種...[繼續(xù)閱讀]
2.3.1.1有機(jī)熒光染料概述近年來(lái),隨著有機(jī)合成技術(shù)的不斷進(jìn)步,有機(jī)熒光染料也迎來(lái)了發(fā)展的黃金時(shí)代,多種多樣的有機(jī)熒光染料從實(shí)驗(yàn)室走向工業(yè)和民用的多個(gè)領(lǐng)域,發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用,如電致發(fā)光顯示屏、化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)...[繼續(xù)閱讀]
2.3.2.1熒光共振能量轉(zhuǎn)移機(jī)理熒光共振能量轉(zhuǎn)移(Frsterresonanceenergytransfer,FRET)是指當(dāng)其中一個(gè)熒光基團(tuán)(能量供體)處于激發(fā)狀態(tài)時(shí),會(huì)將其能量轉(zhuǎn)移給相鄰的分子(能量受體),從而引起能量受體的激發(fā),實(shí)現(xiàn)能量由供體向鄰近的受體轉(zhuǎn)移的...[繼續(xù)閱讀]
法醫(yī)DNA熒光檢測(cè)試劑盒,由于其對(duì)多重PCR擴(kuò)增靈敏性、均一性、保真性的嚴(yán)苛要求,引物的熒光標(biāo)記以及規(guī)?；呒兌鹊臒晒鈽?biāo)記引物的分離成為制約該試劑盒高質(zhì)量、規(guī)?；a(chǎn)的最重要的因素之一。由于全自動(dòng)DNA合成儀的廣泛推廣...[繼續(xù)閱讀]
2.4.1.1基因座選擇和排布從法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別和親緣鑒定的實(shí)用性考慮,選擇STR基因座的基本條件包括兩方面的要求,即多態(tài)性程度和擴(kuò)增的穩(wěn)定性。理想的基因座應(yīng)具備以下幾個(gè)條件:a.等位基因長(zhǎng)度在500bp以下。b.重復(fù)單位為三核苷酸以...[繼續(xù)閱讀]